AJRCCM：间质性肺病患者中成纤维细胞活化蛋白（

1、目前本事域的科学问题？

目前缺少一种评估间质性肺病（ILD）运动性纤维化的非侵入性技术，导致疾病诊断延迟或抗纤维化药物的「盲目」处方。

2、该研讨对这一范畴的贡献？

此研讨的临床前和临床数据显示，FAP是ILD运动性纤维化的高度特异生物标记物，FAP靶向PET成像可用于预测疾病进展。

理论根据

肺成纤维细胞的连续活化和由此发生的细胞外基质过度合成是ILD患者的有害事件。肺活检是ILD纤维化状况的重要评估技术，但也是触发急性加重的主要危险因素。

成纤维细胞活化蛋白（FAP）是久负盛名的活化的成纤维细胞的表面生物标记物，但它在ILD中的表达模式和诊断意义尚不明白。

研讨目标

本研讨旨在全面研讨FAP的表达强度是否可以用作定量估量/测量ILD肺中活化成纤维细胞数目。

研讨方式

首次采取多种方式检测FAP在人类原代肺成纤维细胞和肺组织标本中的表达，方式包含qPCR，western blot，免疫荧光染色，全切片的免疫组化深度学习以及单细胞测序数据剖析。

此外，不同类型的ILD患者（基线数据见文末附表）进行了FAP标志的PET/CT检讨，剖析了FAP示踪剂摄取与肺功能参数的关系。

重要研讨成果

首次发现，在肺成纤维细胞激活事件的早期阶段，FAP表达明显上调，以响应低剂量的促纤维化细胞因子。

单细胞测序数据进一步表明，ILD肺中几乎所有FAP阳性细胞都是发生胶原的成纤维细胞。免疫组化剖析证实，FAP表达程度与ILDs患者肺活检切片中成纤维细胞病灶的丰度亲密相干。

研讨发现FAPI PET示踪剂的总摄取量（FAPI SUV total）与ILD患者的肺功能降落明显相干。

研讨结论

该研讨成果强烈支撑FAP的体外和体内检测可以评估ILD的促纤维化活性，这可能有助于早期诊断和选择适合的治疗窗。

Figure 1. 人原代肺成纤维细胞TGF-β调控FAP表达。

(A) 来自健康供体的人原代肺成纤维细胞（HPLF）在指定时光（24、48和72小时）用TGF-β（10ng/ml）处置。在每个时光点设置相应的阴性对比，然后通过Western blot成果剖析FAP、纤维衔接蛋白和α-SMA的表达。

(B) 同时，采取免疫荧光染色检测TGF-β（10ng/ml）处置后不同时光点FAP的表达。红色表现FAP免疫反响信号，蓝色表现DAPI染色。

(C) 在TGF-β剂量依赖性试验中，采取5个浓度梯度（0.5、1、2、5、10ng/ml）的TGF-β和阴性对比（0ng/ml TGF-β）组处置48h。Western blot用于剖析FAP、纤维衔接蛋白、Ⅰ型胶原和α-SMA的表达。

(D) 博莱霉素模型不同时光点小鼠肺组织FAP的表达。

Figure 2. IPF和非IPF患者移植肺组织中FAP蛋白和mRNA的表达。

(A-B) 使用来自健康供体（n=6）和IPF（n=8）或非IPF ILD（矽肺，n=12）患者的冷冻肺组织，通过Western blot评估FAP表达，**P

(C) qPCR剖析FAP的mRNA表达。β-actin作为内参照。将一名健康供体（1#）中FAP的相对表达指定为样本对比并设置为1。通过与对比的比拟计算其他个体中的表达倍数。虚线是中位数，**P